Estudo prospectivo para validação de protocolo único para o teste respiratório com ureia marcada com carbono-13 empregando dois dispositivos diferentes, no diagnóstico da infecção por H. pylori / Prospective study for validation of a single protocol for the 13c-urea breath test using two different devices in the diagnosis of h. pylori infection

ABSTRACT BACKGROUND: 13C-urea breath test (UBT) is the gold-standard, noninvasive method for H. pylori diagnosis. However, there is no uniform standardization of the test. This situation can be unpractical for laboratories running with two or more devices. OBJECTIVE: To perform a prospective comparison validation study of UBT employing one validated protocol for two different devices: BreathID Hp Lab System® (Exalenz Bioscience Ltd, Israel), here called device A and IRIS-Doc2® (Wagner Analysen-Technik, Germany, now Mayoly Spindler Group, France), here called device B, in the diagnosis of H. pylori infection. METHODS: A total of 518 consecutive patients (365 females, 153 males, mean age 53 years) referred for UBT were included. All patients received device A protocol as follow: after at least one hour fasting, patients filled two bags prior to the test, then ingested an aqueous solution containing 75 mg of 13C-urea with a 4.0 g citric acid powder and filled another two bags 15 min after ingesting the test solution. One pair of breath sample bags (before and after ingestion) was analyzed by the two different devices. A delta over baseline (DOB) ≥5‰ indicated H. pylori infection. Statistics: Wilcoxon test, kappa coefficient with 95% CI, Wilson's method. RESULTS: Considering the device A protocol as the gold standard, its comparison with device B showed a sensitivity of 99.3% (95% CI: 96.3-99.9) and a specificity of 98.9% (95% CI: 97.3-99.6). Kappa coefficient was 0.976 (95% IC: 0.956-0.997). CONCLUSION: Correlation between the two devices was excellent and supports a uniform standardization of UBT.

RESUMO CONTEXTO: O teste respiratório com ureia-marcada com carbono-13 (TR-13C) é o método padrão-ouro para o diagnóstico não invasivo da infecção por H. pylori. Apesar disto, não existe uma uniformização de protocolos para a sua realização, trazendo dificuldades operacionais para laboratórios ou clínicas que operam com equipamentos de fabricantes diferentes. OBJETIVO: Estudo prospectivo e comparativo para validação do TR-13C para o diagnóstico de infecção por H. pylori, com emprego de protocolo único para dois equipamentos diferentes, a saber: BreathID Hp Lab System® (Exalenz Bioscience Ltd, Israel), aqui denominado equipamento A e IRIS-Doc2® (Wagner Analysen-Technik, Alemanha, agora Mayoly Spindler Group, França), aqui denominado equipamento B. MÉTODOS: Um total de 518 pacientes (365 mulheres e 153 homens, idade média de 53 anos) consecutivamente encaminhados para a realização do TR-13C foram incluídos no estudo. Todos os participantes realizaram TR-13C, que foi processado e analisado simultaneamente pelos dois equipamentos. Embora os dois equipamentos possuam protocolos independentes previamente validados, foi optado, por sua maior praticidade, pela utilização de um único protocolo, conforme recomendado pelo fabricante do equipamento A, e assim resumido: após jejum mínimo de 1h, foram amostras de ar expirado coletadas em dois pequenos sacos coletores (120 mL), correspondendo ao tempo-zero (amostra-1, controle). Em seguida, os pacientes ingeriram, em até 2 min, uma solução aquosa (200 mL) contendo 75 mg de 13C-ureia e 4,0 gramas de ácido cítrico em pó, adicionado com edulcorante. Uma segunda coleta de ar expirado era realizada 15 min após a ingestão do substrato em dois novos pequenos sacos coletores, correspondendo à amostra-2. Foram considerados positivos para a presença da infecção por H. pylori quando apresentavam um delta over baseline (DOB) igual ou maior que 5‰. Análise estatística foi realizada com o teste de Wilcoxon, coeficiente kappa com IC 95% e método de Wilson. RESULTADOS: Considerando o protocolo do equipamento A como o padrão-ouro, sua comparação com o equipamento B mostrou sensibilidade de 99,3% (IC 95%: 96,3-99,9) e especificidade de 98,9% (IC 95%: 97,3-99,6). O coeficiente kappa observado foi de 0,976 (IC 95%: 0,956-0,997). CONCLUSÃO: A correlação entre os dois equipamentos foi excelente e contribui para uma uniformização de protocolos para TR-13C.

Correlation between virulence markers of Helicobacter pylori in the oral cavity and gastric biopsies / Correlação entre marcadores de virulência de Helicobacter pylori na cavidade oral e em biópsias gástricas

ABSTRACT BACKGROUND: The clinical outcome of Helicobacter pylori infection has been associated with virulence factors. The presence of these factors is useful as molecular markers in the identification of the high risk for developing severe gastric pathologies. OBJECTIVE: To correlate the presence of virulence markers cagA and bab2A of H. pylori in oral and gastric biopsy samples. METHODS: An observational, prospective, descriptive, and cross-sectional study was carried out between September 2011 and September 2012. Patients suffering dyspepsia with indication for upper gastrointestinal video endoscopy who attended the Gastroenterology Service of the Hospital Dr. Julio C. Perrando were included. Epidemiological investigation was completed. To detect the bacteria and their virulence genes, samples of saliva, dental plaque and gastric biopsy were taken and processed by PCR. RESULTS: Sixty-one patients were selected for this study (30 women and 31 men). H. pylori was detected in 31 gastric biopsies and 31 oral samples. Significant difference between oral and gastric samples was found in cagA genotype. Agreement between oral and gastric genotypes was found in 38.7% of samples from the same patient. CONCLUSION: This study is the first in provide information about the genotypes of the Argentinean Northeast H. pylori strains. Despite the high prevalence of H. pylori infection, the most of patients had less virulent genotypes in oral cavity and gastric tissue. The cagA / babA2 combination was not frequent in the samples studied. There was not a statistical correlation between the virulence genes and gastroduodenal or oral diseases. Although in some patients the same genotype was found both in oral and gastric samples, it cannot be ensure that they corresponding to the same strain because a DNA sequencing was not performed.

RESUMO CONTEXTO: O resultado clínico da infecção por Helicobacter pylori tem sido associado com fatores de virulência. A presença desses fatores como marcadores moleculares é útil na identificação do risco elevado para o desenvolvimento de graves patologias gástricas. OBJETIVOS: Correlacionar a presença de marcadores de virulência cagA e bab2A do H. pylori em amostras de biópsias gástricas e orais. MÉTODOS: Um estudo observacional, prospectivo, descritivo e transversal foi realizado entre setembro de 2011 e setembro de 2012. Foram incluídos pacientes com sintomas de dispepsia com indicação de endoscopia gastrointestinal que compareceram ao Serviço de Gastroenterologia do Hospital Dr. Julio C. Perrando . Investigação epidemiológica foi concluída. Para detectar a bactéria e seus genes de virulência, amostras de saliva, placa dentária e biópsia gástrica foram tomadas e processadas pelo PCR. RESULTADOS: Sessenta e um pacientes foram selecionados para este estudo (30 mulheres e 31 homens). H. pylori foi detectado em 31 biópsias gástricas e 31 amostras orais. Foi encontrada diferença significativa entre as amostras orais e gástricas no genótipo cagA . A ocorrência simultânea entre genótipos orais e gástricos do mesmo paciente foi encontrada em 38,7% das amostras. CONCLUSÃO: Este é o primeiro estudo a fornecer informações sobre os genótipos das cepas do H. pylori no Nordeste Argentino. Apesar da alta prevalência da infecção pelo H. pylori , a maioria dos pacientes tinha genótipos menos virulentos na cavidade oral e tecido gástrico. A combinação cagA / babA2 não foi frequente nas amostras estudadas. Não houve correlação estatística entre os genes de virulência e doenças gastroduodenais ou orais. Embora em alguns pacientes o mesmo genótipo tenha sido encontrado tanto nas amostras orais quanto gástricas, não se pode garantir que correspondam à mesma variação, pois um sequenciamento de DNA não foi realizado.

Is the immunocromatographic fecal antigen test effective for primary diagnosis of helicobacter pylori infection in dyspeptic patients? / Teste imunocromatográfico do antígeno fecal: efetivo no diagnóstico primário da infecção por Helicobacter pylori em pacientes dispépticos?

ABSTRACT Background The diagnosis of H. pylori infection can be performed by non-invasive and invasive methods.The identification through a fecal antigen test is a non-invasive, simple, and relatively inexpensive test. Objective To determine the diagnostic performance of fecal antigen test in the identification of H. pylori infection. Methods H. pylori antigens were identified in the stools of dyspeptic patients undergoing upper gastrointestinal endoscopy. For the identification of H. pylori antigen, we use ImmunoCard STAT! HpSA with immunochromatography technique. Histopathology plus urease test were the gold standard. Results We studied 163 patients, 51% male, mean age of 56.7± 8.5years. H. pylori infection was present in 49%. Fecal test presented: sensitivity 67.5% (CI95% 60.6-72.9); specificity 85.5% (CI95% 78.9-90.7); positive predictive value 81.8% (CI95% 73.4-88.4) and negative predictive value 73,2% (CI95% 67.5-77.6); Positive likelihood ratio was 4.7 (CI95% 2.9-7.9) and Negative Likelihood Ratio 0.4 (CI95% 0.3-0.5). The prevalence odds ratio for a positive test was 12.3 (CI95% 5.7-26.3).The index kappa between FAT and histology/urease test was 0.53 (CI95% 0.39-0.64). Conclusion Immunochromatographic FAT is less expensive than the other methods and readily accepted by the patients but its diagnostic performance does not recommend its use in the primary diagnosis, when the patient may have an active infection.

RESUMO Contexto O diagnóstico da infecção por Helicobacter pylori (H. pylori) pode ser realizado por métodos invasivos e não invasivos. A identificação através do teste do antígeno fecal é um método não invasivo, simples, fácil e relativamente barato. Objetivo Determinar o desempenho diagnóstico do teste fecal imunocromatográfico na identificação da infecção pelo H. pylori. Métodos A pesquisa de antígenos fecais do H. pylori foi realizada através do ImmunoCard STAT! HpSA em pacientes dispépticos submetidos à endoscopia digestiva alta com coleta de biópsias para histopatologia e teste da urease, utilizados como padrão ouro. Resultados Foram estudados 163 pacientes, 51% do sexo masculino, com idade média de 56,7± 8,5 anos. A infecção por H. pylori esteve presente em 49%. O teste fecal apresentou o seguinte desempenho diagnóstico: sensibilidade 67,5% (IC95% 60,6-72,9), especificidade 85,5% (IC95% 78,9-90,7), valor preditivo positivo 81,8% (IC95% 73,4-88,4) e valor preditivo negativo 73,2% (IC95% 67,5-77,6). A razão de probabilidade positiva foi 4,7 (IC95% 2,9-7,9) e a razão de probabilidade negativa foi 0,4 (IC95% 0,3-0,5). A razão de chances de prevalência para teste fecal positivo foi 12,3 (IC95% 5,7-26,3). O índice kappa para a concordância do teste fecal com histologia/teste da urease foi 0,53 (IC95% 0,39-0,64) Conclusão O teste fecal imunocromatográfico apresenta baixo custo e é facilmente aceito pelos pacientes, no entanto seu desempenho diagnóstico não o recomenda para diagnóstico primário.

Investigation of the association between glaucoma and Helicobacter pylori infection using the 14C-urea breath test / Investigação de associação entre glaucoma e infecção pelo Helicobacter pylori pelo teste respiratório da ureia 14C

ABSTRACTPurpose:To investigate the association between glaucoma and Helicobacter pylori infection by evaluating for the presence of H. pylori infection in patients with glaucoma using the 14C-urea breath test (14C-UBT).Methods:Using 14C-UBT, H. pylori infection positivity was compared between a group of patients with primary open-angle glaucoma and a control group with normal intraocular pressure and a normal optic disc or normal perimetry.Results:The 14C-UBT was positive in 18 (51.42%) out of 35 patients in the glaucoma group and in 15 (42.85%) out of 35 patients in the control group. H. pylori infection positivity rates were similar between the glaucoma and control groups (p>0.05).Conclusion:According to the 14C-UBT, there is no association between primary open-angle glaucoma and H. pylori infection.

RESUMOObjetivo:Investigar a associação entre glaucoma e infecção por H. pyloripor meio do teste para a presença de infecção por H. pylori em pacientes com glaucoma usando o teste de respiração da ureia 14C (14C-UBT).Métodos:Foi feita uma comparação em relação a positividade H. pyloriutilizando 14C-UBT entre um grupo de pacientes com glaucoma primário de ângulo aberto e um grupo controle com pressão intraocular normal e sem verificação de disco óptico glaucomatosa.Resultados:O 14C-UBT foi positivo em 18 (51,42%) dos 35 pacientes no grupo de glaucoma e em 15 (42,85%) dos 35 pacientes no grupo de controle. As taxas de positividade foram semelhantes entre os grupos de glaucoma e de controle e não houve diferença significativa entre os grupos (p>0,05).Conclusão:De acordo com o 14C-UBT, não há associação entre o glaucoma primário de ângulo aberto e H. pylori.